用于非標記生物分子相互作用分析的生物層干涉技術(shù)(BLI)
20 多年來,我們通過創(chuàng)建成熟的無流路生物層干涉 (BLI) 系統(tǒng)、耗材和軟件,為客戶提供了可靠的支持。我們的產(chǎn)品受到來自世界各地科學家的青睞,為他們在生物分子相互作用分析領(lǐng)域的研發(fā)需求提供支持,涵蓋范圍包括藥物研發(fā)、抗體工程、生物工藝和質(zhì)量控制 (QC)。
我們獲得了良好的市場口碑及用戶反饋, 體現(xiàn)在3,500 多臺安裝的客戶基礎上,并且在超過 7,000 篇客戶出版物中留下深深的足跡。多年來,我們的第一要務始終是提供非凡的技術(shù)和科學支持,確保您能夠快速有效地利用我們的產(chǎn)品來實現(xiàn)您的實驗目標。
Octet? 在我們的未來藍圖里占據(jù)重要地位,該系統(tǒng)率先將行業(yè)領(lǐng)先的非標記技術(shù)-生物層干涉(BLI)和表面等離子共振 (SPR) 相結(jié)合,通過實時非標記技術(shù)檢測結(jié)合動力學和親和力,以確定分析物的濃度及結(jié)合活性。
隆重介紹:Octet?BLI 解決方案
提供性能出色、靈活可靠,助力實時、非標記且高質(zhì)量的結(jié)合動力學和定量分析
Octet? BLI 系統(tǒng)為蛋白-蛋白和蛋白-小分子互作分析提供了一種無流路、快速且高通量的可靠方法。Octet??BLI 平臺可以直接檢測特定的蛋白或藥物分子,即使是復雜的混合物和未純化的樣品也可以輕松檢測,如細胞培養(yǎng)上清液和裂解物。?
讓貨真價實的 Octet? 平臺為您的研究賦能,助您加快產(chǎn)品上市、縮短項目周期并且提升項目能力。
生物層干涉(BLI)儀器
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20 年專業(yè)的 BLI 知識
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看看 Octet? BLI 的用戶是怎么說的
全球數(shù)以千計的研究人員在藥物發(fā)現(xiàn)、生物制藥開發(fā)和學術(shù)研究等不同領(lǐng)域使用 Octet? 系統(tǒng),進行實時分析結(jié)合特異性、活性分析物濃度、親和力或結(jié)合動力學。看看用戶如何評價Octet? BLI 這一不可或缺的工具,幫助他們推進研究、加快新療法和診斷開發(fā)。
Octet? 性能:靈敏、免清洗且可重復的數(shù)據(jù)
基線穩(wěn)定性、低信噪比和低基線漂移是高質(zhì)量數(shù)據(jù)的關(guān)鍵
Octet? R 系列為生物分子分析提供了一種先進的、無流路的方法,配備多種現(xiàn)成生物傳感器,可用于快速結(jié)合動力學和定量分析。這些系統(tǒng)利用了賽多利斯貨真價實的非標記生物層干涉 (BLI) 技術(shù),能夠直接檢測特定的蛋白和其他生物分子 —— 即使是粗細胞培養(yǎng)上清液和裂解物這樣的復雜混合物也能從容應對。
Octet? BLI 系統(tǒng)通過實時監(jiān)測結(jié)合事件,計算結(jié)合速率 (ka)、解離速率 (kd) 和親和常數(shù) (KD)。該系統(tǒng)具有優(yōu)越的靈敏度,能夠測量分子量低至 150 Da 的小分子。以下示例顯示了小分子相互作用的動力學分析。
圖 1.?配體生物素化碳酸酐酶與小分子分析物呋塞米 (330.7 Da) 之間的動力學分析,在 Octet??R8 系統(tǒng)上使用 超級鏈霉親和素 (SSA) 生物傳感器進行,分析條件為 1000 rpm 和 25 ℃。制備呋塞米樣本溶液,分別以 0.1、0.3、1.0、3.0、10.0 μM (n=4) 的濃度制備連續(xù)稀釋溶液。采用 1:1 結(jié)合模型處理數(shù)據(jù)并擬合曲線。?
以高分辨率和低信噪比測量高親和力相互作用?
緩慢解離速率顯示解離步驟中信號變化極小,需要結(jié)合穩(wěn)定基線和低基線漂移以準確測量解離。
此外,捕獲可測量的相互作用解離過程可能需要數(shù)小時 (> 2h) 的數(shù)據(jù)采集,尤其是對于高親和力相互作用,通常具備緩慢的解離速率。因此,測量較長的解離時間對于測量高親和力相互作用也至關(guān)重要。
Octet? R8 系統(tǒng)可在單次無人值守運行中同時測量多達 8 份樣本。結(jié)合獨有的防蒸發(fā)蓋,通過盡量減少蒸發(fā)保持樣品完整,可以讓科學家借助長達 12 小時的蒸發(fā)控制收集準確的測量值。
使用Octet?R8進行緩慢解離過程的高親和力相互作用檢測,重復三次測定結(jié)果如下??贵w-抗原相互作用的完整動力學表征運行 3 次,總運行時間為 11 小時。
圖 2 和圖 3 分別為長時間解離測量的兩個示例,該測量長達幾個小時,旨在檢測非常緩慢的解離速率。
生物層干涉技術(shù)(BLI)的應用
Octet? 非標記 BLI 系統(tǒng)的應用
結(jié)合動力學
- 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用
- 抗體表征
- 抗體-抗原結(jié)合
- 蛋白質(zhì)-小分子相互作用
- DNA-適配體結(jié)合
- 細菌-抗體相互作用
- 類病毒顆粒-抗體/蛋白質(zhì)結(jié)合
- 表位分型
- GPCR-蛋白質(zhì)結(jié)合
- 解離速率排名
- 親和力成熟
定量分析
- 抗體定量
- 蛋白質(zhì)定量
- AAV滴度
- 糖基化分析
- ELISA替代
- 粗提物中的蛋白質(zhì)定量
- 污染物檢測
- 表達監(jiān)測
- 免疫原性
- 疫苗誘導的抗體反應
- 效力測定
篩選
- 結(jié)合物篩選(雜交瘤、PAGE或裂解物)
- DNA適配體篩選
- 二次篩選和命中驗證
- 抑制劑篩選
- 克隆選擇
測定開發(fā)
- 配方開發(fā)
- 培養(yǎng)基開發(fā)
- 細胞系開發(fā)
- 細胞系優(yōu)化
- 側(cè)向流動測定驗證
特色 BLI 資源
Octet? BLI 產(chǎn)品為受監(jiān)管環(huán)境下的用戶提供可靠支持
不僅僅是 GxP 合規(guī)工具——更是一套綜合工具箱
賽多利斯針對從抗體定量、配體結(jié)合表征到效價測定的多項應用提供了廣泛的 GxP 合規(guī)工具,用戶可以使用這些工具在貨真價實的 Octet??BLI 平臺上開發(fā)經(jīng)過驗證的測定方法。
美國藥典 (USP) 最近發(fā)布了新的通則<1108>,該通則首次引用了生物層干涉法在關(guān)鍵配體結(jié)合應用中的使用,該方法提供了更精確的動力學數(shù)據(jù),并且可以測量相對廣泛的結(jié)合親和力。
賽多利斯提供 Octet??21 CFR Part 11 軟件和全系列 GxP 產(chǎn)品和服務,作為 Octet??GxP 工具包的一部分一并交付,并且還包括我們的生物傳感器驗證支持服務。
Octet? BLI 用戶可以借助該服務在檢測和驗證期間對多個批次的生物傳感器進行檢測,并保留一個經(jīng)過充分表征的批次用于購買??蛻糇疃嗫梢杂嗁?5 個不同批次的生物傳感器,每批最多 20 盒用于評價,并預留 40 盒該批次的傳感器用于未來購買。
Octet?? BLI 數(shù)據(jù)幫助藥物在監(jiān)管審批過程中獲批
Octet?? BLI 檢測有助于識別潛在的安全性問題,提高藥物評估的準確性。以下是輝瑞、阿斯利康、羅氏等公司利用該檢測方法生成數(shù)據(jù)的幾個案例,這些數(shù)據(jù)已作為藥物獲批的一部分支持信息提交給 FDA 或 EMA 等監(jiān)管機構(gòu)。
常見問答
生物層干涉 (BLI) 是一種測量生物分子相互作用的非標記技術(shù)。它是一種光學分析技術(shù),因具有實時、高通量的分析能力,在生物化學、生物學和醫(yī)學研究領(lǐng)域得到廣泛應用。
生物層干涉 (BLI) 是一種非標記分析技術(shù),常用于研究生物分子相互作用。這項技術(shù)所依據(jù)的原理是光學干涉,即生物傳感器尖端上構(gòu)建的生物層厚度發(fā)生變化,從生物層反射的白光干涉圖樣也會隨之發(fā)生變化。干涉圖樣的變化與生物層厚度的實時變化相關(guān),從而可以監(jiān)測分子的結(jié)合和解離。
BLI 特別適用于在不需要熒光或放射性標記的情況下,提供有關(guān)分析物濃度、結(jié)合動力學、結(jié)合親和力和生物分子相互作用特異性的定量數(shù)據(jù)。因此,這項技術(shù)成為藥物開發(fā)、抗體檢測和蛋白質(zhì)分析等各個領(lǐng)域的熱門選擇。
在 BLI 中,生物傳感器尖端浸入含有生物分子的溶液,這些分子與生物傳感器結(jié)合,形成一層薄薄的生物層。隨著越來越多的分子與生物傳感器結(jié)合,干涉圖樣發(fā)生變化,反射光的波長也隨之發(fā)生變化。通過監(jiān)測這種變化,科學家就可以實時追蹤結(jié)合過程,以便測量結(jié)合速率 (ka) 和解離速率 (kd),以及相互作用的結(jié)合親和力 (KD),從而深入了解多種分子的生物分子相互作用。
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與其他生物分子結(jié)合分析方法(如表面等離子共振 (SPR) 和酶聯(lián)免疫吸附測定 (ELISA))相比,生物層干涉 (BLI) 具有多項優(yōu)勢。以下是一些主要優(yōu)勢:
- BLI 是一種非標記技術(shù),避免了標記帶來的潛在干擾,從而可以分析未修飾的生物分子。
- BLI 可實時分析生物分子相互作用,包括結(jié)合動力學、親和力和濃度。
- 兼容多種樣品類型:BLI 可用于多種樣品類型,包括粗制樣品或復合物基質(zhì)中的樣品,且不會產(chǎn)生明顯干擾
- 只需要很少或者根本不需要樣品制備,這有利于高通量篩選。
- 應用范圍廣泛:BLI 可用于研究各種相互作用,包括蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-DNA/RNA、蛋白質(zhì)-小分子,甚至還可以用于研究基于細胞的相互作用。這種多功能性使其可應用于許多研究和開發(fā)環(huán)境。
- 樣品消耗少:BLI 通常只需要少量樣品并且支持重復利用,這在處理珍貴或有限的材料時非常有利。
- 簡便易用高通量:BLI 儀器通常簡便易用,方便用戶操作,并且能夠同時處理多個樣品,適用于高通量篩選應用。
- 成本效益:與其他一些技術(shù)相比,BLI 更具成本效益,尤其是在試劑使用和設備維護方面。
生物層干涉 (BLI) 在生物醫(yī)學研究、藥物發(fā)現(xiàn)和診斷開發(fā)等各個領(lǐng)域具有巨大潛力。這是一種非常高效的工具,支持抗體表征和研究蛋白質(zhì)與小分子之間的相互作用,對于治療開發(fā)有極大的幫助。
BLI 可用于生物仿制藥生產(chǎn)、疫苗功效評估和蛋白質(zhì)治療藥物的質(zhì)量控制。它還有利于通過配體和受體、核酸和蛋白質(zhì)之間的相互作用研究細胞信號傳導和基因調(diào)控。在生物制藥行業(yè),BLI 在確保質(zhì)量控制方面可以發(fā)揮關(guān)鍵作用,并有助于開發(fā)用于檢測疾病生物標志物的診斷工具,凸顯出這項技術(shù)在生命科學領(lǐng)域的廣泛應用。
BLI 生物傳感器采用干涉原理,利用白光源發(fā)射各種波長的光。傳感器尖端生物表面頂部反射的光與內(nèi)部參考層反射的光之間互相干擾,從而產(chǎn)生干涉圖樣。使用檢測器(通常是光譜儀或光電探測器)捕獲所產(chǎn)生的圖樣,用于測量干擾信號的變化。干涉圖樣的變化與傳感器表面發(fā)生的生物分子相互作用直接相關(guān)。
生物層干涉是一種功能強大又多樣的技術(shù),為研究生物分子相互作用提供了有價值的工具。它能夠提供實時、非標記分析,是促進生物化學、生物學和醫(yī)學研究理解的寶貴工具,在新藥和新療法的開發(fā)中起到關(guān)鍵作用。