CAR-T 細(xì)胞：功能和表型篩選
在完成嵌合抗原受體 (CAR) 構(gòu)建體的設(shè)計(jì)和評(píng)估并且要推進(jìn)到擴(kuò)增階段時(shí)，我們需要量化細(xì)胞的表型和功能，以確保維持所需的細(xì)胞特征。
賽多利斯提供體外、基于細(xì)胞的功能和表型分析平臺(tái)，能夠?qū)﹃P(guān)鍵 CAR-T 細(xì)胞功能進(jìn)行定量和預(yù)測(cè)性評(píng)估，從而促進(jìn)有效和新穎的 CAR-T 治療的發(fā)現(xiàn)。
- 評(píng)估轉(zhuǎn)化為體內(nèi)功能的參數(shù)
- 更好地了解 T 細(xì)胞生物學(xué)
- 簡(jiǎn)化有效 CAR-T 候選藥物的發(fā)現(xiàn)
功能和表型篩選解決方案
iQue? 高通量流式細(xì)胞平臺(tái)
iQue? 高通量流式細(xì)胞平臺(tái)具有一個(gè)較寬的固定動(dòng)態(tài)范圍，研究人員可以基于該范圍評(píng)估 CAR-T 細(xì)胞的表型和功能，避免不同時(shí)間點(diǎn)的差異，并且無(wú)需拆分樣品進(jìn)行后續(xù)分析。高通量平臺(tái)提供的檢測(cè)方法可以實(shí)現(xiàn)以下幾點(diǎn)：
- 提供可重復(fù)且生物學(xué)相關(guān)的結(jié)果
- 評(píng)估細(xì)胞對(duì)靶標(biāo)的功能反應(yīng)性
- 結(jié)合功能讀數(shù)來(lái)評(píng)估細(xì)胞表型，功能讀數(shù)包括估計(jì)效應(yīng)細(xì)胞激活和細(xì)胞毒性殺傷
- 只需要一份樣品即可同時(shí)定量分泌細(xì)胞因子水平和表型
- 量化抗原和免疫抑制分子的腫瘤表達(dá)
特色分析產(chǎn)品：iQue? 人 T 細(xì)胞活化和細(xì)胞因子分析試劑盒
iQue? 人 T 細(xì)胞活化和細(xì)胞因子分析試劑盒能夠評(píng)價(jià) T 細(xì)胞的活化狀態(tài)，同時(shí)還能提供關(guān)于細(xì)胞健康及其在細(xì)胞因子分泌中的作用的相關(guān)信息。這種單次清洗分析需要的手動(dòng)操作時(shí)間極少，可測(cè)定細(xì)胞和微球，提供以下生物學(xué)信息：
- 使用膜完整性熒光染料進(jìn)行染色，區(qū)分活免疫細(xì)胞與死細(xì)胞。
- 對(duì)細(xì)胞進(jìn)行免疫表型分析，使用熒光抗體 panel 染色區(qū)分 CD3+ T 細(xì)胞、CD3-非 T 細(xì)胞、CD4+ T 輔助細(xì)胞、CD8+ 細(xì)胞毒性 T 細(xì)胞。
- 根據(jù) 3 個(gè)活化標(biāo)記物的表達(dá)分析 T 細(xì)胞表型 - CD69（早期表達(dá)）、CD25（晚期表達(dá)）和 HLA-DR（更晚期表達(dá)，在強(qiáng)烈刺激下）。
采用優(yōu)化的工作流程，可在單孔中測(cè)定活化 T 細(xì)胞分泌的效應(yīng)細(xì)胞因子 - Th1 細(xì)胞因子 IFNγ/多功能細(xì)胞因子 TNFα。
Incucyte? 活細(xì)胞分析平臺(tái)
Incucyte? 活細(xì)胞分析系統(tǒng)經(jīng)過(guò)精心設(shè)計(jì)，可有效捕獲孵育箱培養(yǎng)箱中發(fā)生的細(xì)胞變化。在 T 細(xì)胞的功能和表型評(píng)估方面，該系統(tǒng)可以深入了解基礎(chǔ)生物學(xué)，例如免疫細(xì)胞激活、增殖和殺傷的機(jī)制。
- 使用集成圖像采集和分析來(lái)識(shí)別細(xì)胞激活狀態(tài)，提高生物洞察力
- 對(duì)細(xì)胞健康、表型、亞群和功能進(jìn)行非侵入性、非破壞性和無(wú)偏倚的分析
- 了解免疫細(xì)胞和癌細(xì)胞動(dòng)態(tài)相互作用的新見(jiàn)解
使用以下 Incucyte? 活細(xì)胞應(yīng)用套件加快您的發(fā)現(xiàn)步伐：
特色活細(xì)胞分析檢測(cè)：CD19 靶向 CAR-T 細(xì)胞殺傷抗原陽(yáng)性靶細(xì)胞
展示 CD19 靶向 CAR-T 細(xì)胞的特異性殺傷特性
Incucyte? 免疫細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)可用于量化 CAR-T 細(xì)胞的功能活性。量化圖像表明，隨著時(shí)間的推移，Ramos 靶細(xì)胞的 CAR-T 細(xì)胞密度顯著下降。
Incucyte? Nuclight 綠色試劑標(biāo)記的 Ramos 或 Jurkat 細(xì)胞與抗 CD19 CAR-T 或?qū)φ?T 細(xì)胞在 96 孔板中以不同的 T:E 比例進(jìn)行共培養(yǎng)。在 4 天內(nèi)，每 4 小時(shí)使用 Incucyte? 對(duì)培養(yǎng)物成像，并對(duì)綠色熒光面積定量。72 小時(shí)拍攝的圖像 (A) 顯示與 CAR-T 細(xì)胞 (1:2 T:E) 結(jié)合的 Ramos 細(xì)胞的綠色熒光面積顯著減少。時(shí)程圖（B 和 C）表明，與抗原陰性 Jurkat 細(xì)胞相比，抗原陽(yáng)性 Ramos 細(xì)胞的殺傷力有所增加。顯示的數(shù)據(jù)為 3 個(gè)孔的平均值 ± SEM。
賽多利斯功能和表型解決方案的優(yōu)勢(shì)：
iQue? 高通量流式細(xì)胞儀平臺(tái)可以省去多次分析的麻煩，在一次實(shí)驗(yàn)中通過(guò)測(cè)量細(xì)胞健康狀況和基于微珠的細(xì)胞因子分泌來(lái)獲取免疫表型數(shù)據(jù)。
使用更少的細(xì)胞和試劑，更快地評(píng)估多項(xiàng)細(xì)胞參數(shù)。
- 免疫細(xì)胞殺傷
- 免疫細(xì)胞評(píng)估
- 細(xì)胞因子分析
iQue? 高通量流式細(xì)胞儀和 Incucyte? 活細(xì)胞分析系統(tǒng)集成了功能強(qiáng)大的軟件，用戶可以即時(shí)訪問(wèn)實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)，借助更好的可視化工具和動(dòng)態(tài)門控功能，輕松解釋復(fù)雜的數(shù)據(jù)集。
賽多利斯基于細(xì)胞的功能和表型定量檢測(cè)提供了可轉(zhuǎn)化為臨床結(jié)果的見(jiàn)解。iQue? 高通量流式細(xì)胞儀和 Incucyte? 活細(xì)胞分析系統(tǒng)可結(jié)合使用，對(duì)免疫細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的腫瘤殺傷進(jìn)行可視化和量化并對(duì)細(xì)胞實(shí)現(xiàn)詳細(xì)表征，如生物標(biāo)志物表型、三系分化能力、活力、耗竭和殺傷效果。
常見(jiàn)問(wèn)題解答
iQue??高通量流式細(xì)胞儀平臺(tái)?可以對(duì)懸浮細(xì)胞和磁珠進(jìn)行高通量測(cè)定，您可以通過(guò)編碼技術(shù)實(shí)現(xiàn)強(qiáng)大的多重方法。借助編碼技術(shù)，您可以將帶有不同目標(biāo)抗原的多個(gè)細(xì)胞群或磁珠整合到測(cè)定板的孔中，從而在同一實(shí)驗(yàn)中篩選多種靶抗原。例如，iQue? 可以在單次分析中根據(jù)增殖、細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞亞群改變（免疫表型）來(lái)測(cè)量 T 細(xì)胞活化。
Incucyte??高級(jí)非標(biāo)記分類分析軟件模塊?采用成熟的非標(biāo)記采集方案以及根據(jù)形態(tài)輕松識(shí)別目標(biāo)細(xì)胞群或免疫細(xì)胞群的高級(jí)分析方案，能夠?yàn)槟峁┮惶淄暾慕鉀Q方案。