免疫應(yīng)答評(píng)估
病原體感染人體時(shí)會(huì)引發(fā)一系列復(fù)雜的免疫應(yīng)答，其中涉及免疫系統(tǒng)的先天性和獲得性應(yīng)答通路。通過(guò)了解針對(duì)感染的免疫應(yīng)答，我們可以更深入地理解到為什么有些人更容易出現(xiàn)感染和相關(guān)并發(fā)癥。
COVID-19 讓我們認(rèn)識(shí)到，我們需要深入了解免疫系統(tǒng)不同組成部分之間的復(fù)雜相互作用，從而迅速開(kāi)發(fā)出新的疫苗和治療方法。
賽多利斯先進(jìn)的細(xì)胞和蛋白質(zhì)分析平臺(tái)通過(guò)提供全面的、相關(guān)性更高的數(shù)據(jù)來(lái)加速新疫苗的發(fā)現(xiàn)和開(kāi)發(fā)，從而幫助對(duì)抗病毒感染。數(shù)據(jù)涉及的關(guān)鍵免疫應(yīng)答包括：
- 中和抗體
- T 細(xì)胞活化、記憶和耗竭
- 細(xì)胞因子分析
- 免疫細(xì)胞殺傷
- NETosis
- 疫苗滴度和效價(jià)
免疫應(yīng)答類型
中和抗體
病原體感染人體時(shí)會(huì)引發(fā)一系列復(fù)雜的免疫應(yīng)答，其中涉及免疫系統(tǒng)的先天性和獲得性臂。通過(guò)了解針對(duì)感染的免疫應(yīng)答，我們可以更深入地理解到為什么有些人更容易出現(xiàn)感染和相關(guān)并發(fā)癥。
使用 iQue? 高通量流式細(xì)胞儀平臺(tái)鑒定和分析中和抗體
鑒定和測(cè)定中和抗體與病毒蛋白質(zhì)結(jié)合的親和力和動(dòng)力學(xué)。
iQue? SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）試劑盒是一種基于微球的免疫分析試劑盒，能夠同時(shí)檢測(cè)人免疫系統(tǒng)針對(duì)病毒感染或接種疫苗產(chǎn)生的靶向 SARS-CoV-2 刺突蛋白 RBD 的 IgG、IgM 和 IgA 抗體。
圖 1：iQue? SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）試劑盒工作流程。操作步驟易于遵守，需要的樣品很少（只需要一份 10 μL 的血漿/血清樣品，至少稀釋 100 倍）。
中和抗體開(kāi)發(fā)中的 Octet? 生物層干涉分析工作流程 1
表位配對(duì)分析有助于鑒定出阻礙靶標(biāo)抗原上相同表位結(jié)合的抗體，在 mAb 的鑒定和工程化中，有利于獲得理想的動(dòng)力學(xué)和親和力特征。該分析格式也可以用于確定中和抗體和病毒受體在與宿主受體結(jié)合方面的競(jìng)爭(zhēng)情況。
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中和抗體開(kāi)發(fā)中的 Octet? 生物層干涉分析工作流程 2
借助實(shí)時(shí)動(dòng)力學(xué)（結(jié)合和解離）和親和力數(shù)據(jù)，您可以更自信、更迅速地挑選靶標(biāo)結(jié)合先導(dǎo)候選物。結(jié)合活性測(cè)量還可用于確定蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和活性，特別適用于疫苗抗原選擇。
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賽多利斯免疫應(yīng)答解決方案提供：
使用活細(xì)胞分析來(lái)定量寨卡病毒感染和登革熱病毒感染的 Vero 細(xì)胞的實(shí)時(shí)增殖情況，細(xì)胞經(jīng)過(guò)甲基巴多索隆或寨卡病毒中和抗血清處理。
通過(guò)組合表型和功能分析（包括 iQue? Qbeads? 試劑盒），可以在不同微球捕獲特定蛋白質(zhì)，從而更好地對(duì)一系列蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子、酶和生長(zhǎng)因子進(jìn)行多重定量。研究人員通過(guò)將 iQue? 平臺(tái)與賽多利斯的基于微球的高靈敏度熒光免疫法結(jié)合使用，測(cè)量了 COVID-19 患者血漿和血清中的 SARS-CoV-2 特異性抗體水平和亞型。Dogan M, Kozhaya L, Placek L, et al.
SARS-CoV-2 specific antibody and neutralization assays reveal the wide range of humoral immune response to virus.?
根據(jù)結(jié)合親和力和動(dòng)力學(xué)評(píng)估，我們可以在開(kāi)發(fā)過(guò)程的早期選擇最佳的疫苗和候選治療藥物。
B. Vogel 等人在研究中使用了 Octet? BLI 儀器，他們對(duì) BNT 162b2 RNA 免疫后的受體親和力進(jìn)行表征，發(fā)現(xiàn)預(yù)融合 SARS-CoV-2 刺突 RNA 疫苗具有高度免疫原性，在動(dòng)物中可預(yù)防肺部感染。
無(wú)損采樣可實(shí)現(xiàn)樣品的完全回收。
查看研究文章概述，了解 Octet? 系統(tǒng)如何在闡明 COVID-19 病毒顆粒的結(jié)合動(dòng)力學(xué)和親和力、中和、交叉阻斷或滴度方面發(fā)揮作用。
免疫應(yīng)答產(chǎn)品的特色
iQue? SARS-CoV-2 (IgG, IgM and IgA) 試劑盒
iQue? SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）試劑盒包含即用型試劑，通過(guò)應(yīng)用于 iQue? VBR 平臺(tái)，可在單孔中同時(shí)檢測(cè)對(duì) SARS-CoV-2 刺突蛋白受體結(jié)合域 (RBD) 具有特異性的人 IgG、IgM 和 IgA 抗體。
- 實(shí)時(shí)結(jié)合動(dòng)力學(xué)和親和力測(cè)定
- 測(cè)定純化和粗制樣品的相互作用
- 快速數(shù)據(jù)采集 - 可同時(shí)采集多達(dá) 96 個(gè)生物傳感器的數(shù)據(jù)
Incucyte??活細(xì)胞分析與免疫細(xì)胞殺傷試驗(yàn)
實(shí)時(shí)模擬體外免疫細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的動(dòng)態(tài)相互作用。使用非侵入性、非破壞性平臺(tái)分析細(xì)胞健康、表型、亞群和功能，為免疫細(xì)胞、抗體功能和殺傷提供新信息。
中和抗體開(kāi)發(fā)中的 Octet? BLI 分析工作流程
表位配對(duì)分析有助于鑒定出阻礙靶標(biāo)抗原上相同表位結(jié)合的抗體，在mAb的鑒定和工程化中，有利于獲得理想的動(dòng)力學(xué)和親和力特征。
免疫應(yīng)答常見(jiàn)問(wèn)題解答
iQue? 自動(dòng)化、高通量、先進(jìn)的流式細(xì)胞儀平臺(tái)讓科學(xué)家能夠快速進(jìn)行多重蛋白質(zhì)分析、免疫表型分析以及功能評(píng)估。該平臺(tái)提供即用型試劑盒，包括 iQue? T 細(xì)胞表型分析試劑盒、用于細(xì)胞因子風(fēng)暴評(píng)估的 Qbeads? 人炎癥組合、用于 T 細(xì)胞激活、記憶、殺傷和耗竭以及細(xì)胞因子分析的試劑盒，用于更深入地表征每個(gè)樣品中的宿主免疫應(yīng)答。
Octet? BLI 系統(tǒng)提供了一種快速有效的蛋白質(zhì)定量方法，因?yàn)槠渫扛?、樣品制備要求更低且運(yùn)行成本更低。Octet? 系統(tǒng)上運(yùn)行的樣品也是可回收的，因此研究人員可以保存寶貴的樣品并將其重復(fù)用于其他實(shí)驗(yàn)。此外，Octet? 分析不受有色樣品中的吸收干擾或混濁樣品的光散射的影響，可用于測(cè)量細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液和血清等粗基質(zhì)中的分析物濃度。
iQue? 高通量流式細(xì)胞儀以及 Octet? BLI 系統(tǒng)已廣泛用于體液免疫應(yīng)答的測(cè)量和表征，即篩選與 COVID-19 患者的 SARS-CoV-2 蛋白結(jié)合的抗體。
Dogan, M., Kozhaya, L., Placek, L., Gunter, C., Yigit, M., Hardy, R., Plassmeyer, M., Coatney, P., Lillard, K., Bukhari, Z., Kleinberg, M., Hayes, C.,- Arditi, M., Klapper, E., Merin, N., Liang, B.T., Gupta, R., Alpan, O., & Unutmaz, D. (2021, Jan 29). SARS-CoV-2 specific antibody and neutralization assays reveal the wide range of the humoral immune response to virus. Commun Biol, 4(1), 129. https://doi.org/10.1038/s42003-021-01649-6 PMID: 33514825; PMCID: PMC7846565.
Zhang, G., Pomplun, S., Loftis, A.R., Loas, A., & Pentelute, B.L. (2020). The first-in-class peptide binder to the SARS-CoV-2 spike protein. bioRxiv, https://doi.org/10.1101/2020.03.19.999318
Wu, Y., Li, C., Xia, S., Tian, X., Kong, Y., Wang, Z., Gu, C., Zhang, R., Tu, C., Xie, Y., Yang, Z., Lu, L., Jiang, S., & Ying, T. (2020). Identification of Human Single-Domain Antibodies against SARS-CoV-2. Cell Host & Microbe, 27, 891–898. https://doi.org/10.1016/j.chom.2020.04.023
病毒誘導(dǎo)細(xì)胞死亡、細(xì)胞活力和細(xì)胞間融合分析等活細(xì)胞分析方法可以進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的、實(shí)時(shí)的活細(xì)胞分析，提供免疫細(xì)胞之間的細(xì)胞和功能性相互作用、抗體應(yīng)答和病原體的深入信息。研究人員使用從數(shù)名 COVID-19 恢復(fù)期供體分離得到的抗 SARS-CoV-2 抗體，通過(guò) Incucyte? S3 活細(xì)胞成像分析系統(tǒng)監(jiān)測(cè)了細(xì)胞死亡和細(xì)胞間融合。Mor., M., Werbner, M., Alter, J., Safra, M., Chomsky, E., Lee J.C., et al. (2021). Multi-clonal SARS-CoV-2 neutralization by antibodies isolated from severe COVID-19 convalescent donors. PLoS Pathog, 17(2), e1009165.
是的，您可以將 Incucyte? Annexin V 紅色染料和 Incucyte? Cytotox 綠色試劑相結(jié)合進(jìn)行多重測(cè)定，從而輕松區(qū)分細(xì)胞凋亡和 NETosis
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