用于快速抗體和 His 標簽蛋白純化的親和層析解決方案
親和層析 （AC） 是生命科學實驗室和生物制藥行業(yè)純化生物制劑的關(guān)鍵步驟。它特別適用于基于與親和配體的特異性相互作用，單步減少抗體和 his 標簽蛋白樣品中的主要污染物。
對于篩選、制備純化和其他研究應(yīng)用，Sartobind?? IDA 和我們的下一代Rapid A 膜層析濾器以即用型針頭式過濾器形式提供，可減少工作流程步驟，更大限度地縮短設(shè)置時間，并確保簡單、靈活和高選擇性的純化。
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親和層析的原理
當細胞培養(yǎng)上清液等復雜混合物通過 Sartobind? Lab 膜層析濾器中的親和層析膜時，對流分子傳輸可有效捕獲目標分子 （MOI），同時宿主細胞蛋白 （HCP） 和 DNA 等雜質(zhì)流過膜。在洗脫 MOI 之前，可以使用洗滌步驟來提高純度。
上樣前需要濃縮或緩沖液置換樣品？
抗體純化
Protein A 是一種來源于金黃色葡萄球菌的細菌細胞壁蛋白。它對免疫球蛋白 G 抗體（包括 mAb）的 Fc 區(qū)具有高親和力。
當固定在層析基質(zhì)上時，Protein A 能夠從復雜混合物（如細胞培養(yǎng)上清液或血清樣品）中選擇性捕獲抗體。該方法提供高純度抗體樣品，可用于從免疫測定到治療性抗體生產(chǎn)的各種應(yīng)用。
His 標簽蛋白純化
二價金屬離子對組氨酸殘基具有特別高的親和力。在研究實驗室中，重組蛋白通常在 N 端或 C 端帶有多聚組氨酸標簽，便于通過固定化金屬親和層析 （IMAC） 選擇性捕獲它們。
由于其重現(xiàn)性、選擇性和溫和的洗脫條件，該方法可以將純化簡化為單步工藝，生產(chǎn)純天然蛋白質(zhì)樣品，為結(jié)構(gòu)和功能研究做好準備。
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常見問題解答
親和層析基于生物分子與所選配體的特異性相互作用。它可用于抗體和其他含 Fc 的分子 （蛋白 A） 或用 his 標簽 （IDA） 改造的蛋白質(zhì)的捕獲純化。
Sartobind?? IDA Lab 也可用于從環(huán)境樣品中捕獲或去除二價金屬離子。
Sartobind? Lab 目前提供蛋白 A 或亞氨基二乙酸 （IDA） 配體。
親和層析基于生物分子與所選配體的特異性相互作用。它可用于抗體 （Protein A） 或用 his 標簽 （IDA） 改造的蛋白質(zhì)的捕獲純化。
Sartobind? IDA Lab 也可用于從環(huán)境樣品中捕獲或去除二價金屬離子。
一個或四個單元、一對魯爾到 UNF 適配器和一個快速入門指南。
兩個裝置、一對魯爾到 UNF 適配器和一個快速入門指南。
是的。雖然我們已采取措施，通過在產(chǎn)品包裝中提供快速入門指南來更大限度地減少對環(huán)境的影響，但如果您需要有關(guān)如何使用我們產(chǎn)品的更多信息，可以從我們 eShop 的相關(guān)產(chǎn)品頁面下載完整的說明手冊。
兩種膜層析裝置均可在有或沒有設(shè)備的情況下使用。注射 泵或蠕動泵 可直接連接到魯爾鎖入口，以更短的設(shè)置時間實現(xiàn)快速純化?；蛘撸ㄒ粚m配器，以便與大多數(shù)液相色譜系統(tǒng)兼容。
柱床體積也稱為膜體積 （MV）。
- Sartobind? Rapid A 實驗室：0.5 mL
- Sartobind? IDA 實驗室：2.1 mL
這些層析單元在大多數(shù)常見的純化緩沖液中是穩(wěn)定的。應(yīng)避免使用氧化劑。
與填料色譜法不同，氣泡不會破壞 Sartobind? 膜。這樣就無需對緩沖液進行脫氣，節(jié)省了大量的制備時間。
為了獲得更優(yōu)的生物分子捕獲效果，我們建議使用與待純化樣品成分相似的緩沖液進行平衡。這是一個快速的過程，只需幾秒鐘的純化周期。
盡管 Sartobind? 膜具有抗堵塞性，但我們建議在上樣前對所有樣品進行預過濾。為了更大限度地提高分析效率，可以將 Minisart? 針頭式過濾器 連接到 Sartobind? Lab入口，以便同時進行預過濾和樣品加載。
如果分子的最佳捕獲條件未知，我們建議在膜上加載不同的金屬離子進行篩選。建議的金屬離子包括鎳 （Ni2+）、鈷 （Co2+）、銅 （Cu2+） 和鋅 （Zn2+）。
也可以進行偵查純化以確定最佳洗滌和洗脫條件。當通過離心機、注射器或泵進行純化時，使用逐漸增加咪唑濃度的緩沖液進行多步洗脫。如果使用液相色譜系統(tǒng)，則應(yīng)用線性洗脫梯度。然后，應(yīng)使用適當?shù)姆椒ǎɡ?SDS PAGE）來分析流出液和洗脫液餾分，并確定哪些條件可提供所需的純度水平。
每個 Sartobind? Lab 膜層析濾器都可以在適當?shù)脑偕蛢Υ嫦露啻沃貜褪褂?。為了保?Sartobind? IDA Lab 單元的結(jié)合載量，建議定期剝離和重新加載螯合金屬離子。
我們建議對每個目標生物分子使用單獨的 Sartobind? Lab 膜層析濾器，以消除殘留風險。
Sartobind? Rapid A Lab 已經(jīng)具有每個循環(huán) ≥17.5 mg 的高動態(tài)結(jié)合載量。
為了純化更多的樣品，可以串聯(lián)運行兩個單元。或者，您可以通過單個膜層析濾器充分利用高流速，在多個循環(huán)中用多個較小的負載純化一個樣品。
是的，有。Sartobind? Rapid A Lab 不僅與所有其他 Sartobind? Lab 膜層析濾器一樣，使用 100% 可再生能源制造，而且能夠重復使用多達 100 次循環(huán)，有可能減少您需要的耗材數(shù)量，從而減少研究浪費。此外，與其他Protein A 填料層析柱和膜層析濾器不同，Sartobind? Rapid A Lab 可以在室溫下儲存，從而減少了對能源密集型冷卻的需求。
