選擇實(shí)驗(yàn)室過濾器時(shí)請(qǐng)考慮以下方面：

• 要過濾多大體積？
• 目標(biāo)是什么？是去除污染物還是濃縮目標(biāo)物？
• 污染物和目標(biāo)物的大小如何？
• 是否需要無菌？
• 需要真空、壓力、注射器、蠕動(dòng)泵或其他操作方法嗎？

確定上述幾點(diǎn)后，即可開始選擇產(chǎn)品。

根據(jù)作用模式或分離原理分類，有壓力、真空、離心、切向流過濾（交叉流過濾）等過濾方式。

過濾器可使用至清楚看到多孔介質(zhì)堵塞或者污染，以至于樣品無法通過，或者流速下降至抑制程度。阻塞前的使用水平取決于樣品顆粒載量和多孔材料密度、孔隙率等。阻塞的過濾器有時(shí)可通過膜沖洗、反向過濾或化學(xué)清洗再生，但這會(huì)帶來其他問題。

可使用去除微觀水平顆粒的過濾器去除細(xì)菌。為確保所有活的和完整的細(xì)菌細(xì)胞被去除，應(yīng)使用 0.22 μm 孔徑的過濾器。通常使用 0.22 μm 纖維素濾膜，例如醋酸纖維素、硝酸纖維素或再生纖維素膜，或聚醚砜或聚四氟乙烯濾膜等 0.22 μm 合成膜去除細(xì)菌細(xì)胞。如果認(rèn)證為滅菌級(jí)，0.22 μm 孔徑濾膜可使生物負(fù)荷下降至 10-7 的無菌保證水平 (SAL)，基本上將通過濾膜的樣品滅菌。

0.45 μm 孔徑過濾器可大量去除較大的細(xì)菌和顆粒物。 0.45 μm 孔徑過濾器約可去除 >90% 的細(xì)菌。但是，要完整去除全部細(xì)菌，建議使用 0.22 μm 孔徑過濾器。

樣品過濾除菌必須使用 0.2 μm 孔徑。但是并非所有 0.2 μm 孔徑過濾器是除菌級(jí)的。為確保樣品可靠地除菌，濾膜必須以經(jīng)驗(yàn)證的程序進(jìn)行滅菌并有無菌認(rèn)證，確保在膜的下游側(cè)沒有污染的細(xì)菌或顆粒物。其次，濾膜必須有通過了使用特別小的缺陷短波單胞菌的細(xì)菌挑戰(zhàn)性試驗(yàn) (BCT)的認(rèn)證說明，以確保濾膜會(huì)截留所有 0.2 μm 及以上的細(xì)胞，確保得到除菌過濾樣品。

支原體是沒有細(xì)胞壁的細(xì)菌。因此，它們是迄今為止最小的一類細(xì)菌，具有可延展的結(jié)構(gòu)。去除樣品中的支原體需要極小的 0.1 μm 濾膜孔徑。這些膜過濾器有針頭過濾器、可換膜膜片及真空過濾器規(guī)格可選。

濾紙，例如玻璃微纖維濾膜、石英濾膜、技術(shù)濾紙和基于纖維素的深層濾膜通常沒有標(biāo)注孔徑。而是提供截留率以提供在過濾器基質(zhì)表面或內(nèi)部截留的顆粒物大小的信息。除非說明，否則這些截留率不是絕對(duì)值，因?yàn)樗鼈冊(cè)O(shè)計(jì)用于捕獲和去除較大顆粒物，用于一般澄清應(yīng)用。

這取決于要過濾的樣品、可能的靶標(biāo)分子/目標(biāo)顆粒和過濾方法。每種膜有各自的特性。例如，再生纖維素 (RC) pH 范圍為 3-14，具有溶劑化學(xué)兼容性高、非特異性吸附極低和流速高的特性，因此成為許多液體樣品過濾應(yīng)用中的全能型膜。聚四氟乙烯 (PTFE) 具有 pH 范圍特別廣 (1-14)、溶劑化學(xué)兼容性極高、流速高和非特異性吸附低的特性 - 但它是疏水性的，因此更適合溶劑或氣體應(yīng)用。

要從細(xì)胞培養(yǎng)液或細(xì)胞培養(yǎng)裂解物中分離靶蛋白和其他分子，可采用過濾步驟，其中細(xì)胞、細(xì)胞碎片和較大的顆粒被 0.2 μm 或 0.45 μm 孔徑的膜截留，而目標(biāo)分子、宿主細(xì)胞蛋白 (HCP) 和其他小細(xì)胞產(chǎn)物通過膜，進(jìn)入到濾液中。為減少膜污染和過濾器堵塞，建議采用預(yù)過濾步驟?？墒褂貌ＡЮw維素預(yù)過濾器進(jìn)行預(yù)過濾，結(jié)合更多孔的微孔過濾器實(shí)現(xiàn)兩步式過濾。同樣，助濾劑（例如制藥級(jí)硅藻土）可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)液中，在 0.2 μm 膜層上形成預(yù)過濾基質(zhì)層，防止堵塞。

通常采用超濾來濃縮蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)室用超濾裝置的產(chǎn)品設(shè)計(jì)包括置于外殼內(nèi)的超濾膜，該超濾膜經(jīng)過專門設(shè)計(jì)，可通過離心、正壓、溶劑吸附和切向流分離方法進(jìn)行濃縮。這些方法使用受控的力，讓溶質(zhì)和非靶標(biāo)分子通過半透超濾膜進(jìn)入滲透液，而較大的目標(biāo)分子截留在截留物中。

有多種純化方法適用于蛋白質(zhì)以及病毒載體和外泌體等其他分子。制備層析技術(shù)因其高分子特異性和高分離分辨率而成為理想選擇，可確保實(shí)驗(yàn)室和工藝條件下的高收率和分子純度。這些層析方法利用一系列化學(xué)技術(shù)，例如離子交換、親和配體、疏水作用、空間排斥或上述方法的混合，稱為混合模式或多模層析。

純化工藝中通常整合精細(xì)純化步驟，去除雜質(zhì)和不需要的分子異構(gòu)體。它通常是純化工藝的最后階段，在需要高水平的分子純度時(shí)會(huì)用到。

捕獲純化是目標(biāo)分子被層析填料特異性靶向并捕獲，例如蛋白 A 配體與免疫球蛋白 G (IgG) 結(jié)合并被捕獲。此時(shí)單位樣品體積的結(jié)合/捕獲容量是首要考慮因素。精細(xì)純化步驟用于針對(duì)性地去除不需要的分子異構(gòu)體和其他雜質(zhì)，例如使用陽(yáng)離子交換膜吸附劑去除所有帶正電的雜質(zhì)，而讓帶負(fù)電的靶標(biāo)分子通過介質(zhì)。

與樣品的各種物理接觸都可能是浸出物和可提取物 (L&E) 的潛在來源，取決于樣品的腐蝕性和化學(xué)反應(yīng)性。評(píng)估哪種過濾器材料和過濾器外殼適合避免 L&E 是值得的。大部分膜材料的純度為 100%，L&E 極低。但是，基于 PTFE、再生纖維素和聚酰胺（尼龍）的膜因良好化學(xué)穩(wěn)定性和高純度而聞名。此外，聚丙烯 (PP) 外殼材料也不造成 L&E。 為確保避免 L&E，建議使用測(cè)試數(shù)據(jù)證明不含 L&E 的設(shè)備和膜，檢查樣品的化學(xué)相容性。

在線文獻(xiàn)、論文和研究論壇是很好的應(yīng)用信息來源。但是，如需各種應(yīng)用工作流程中過濾方法的具體建議，賽多利斯有豐富的測(cè)試數(shù)據(jù)、技術(shù)指南和應(yīng)用指南，可聯(lián)系我們獲取建議和咨詢工作流程。此外，賽多利斯通常免費(fèi)提供產(chǎn)品樣品或演示，幫助用戶確認(rèn)優(yōu)異實(shí)驗(yàn)室過濾工藝。