嵌合抗原受體簡(jiǎn)化解決方案
嵌合抗原受體 (CAR) 經(jīng)過設(shè)計(jì)特異性靶向癌細(xì)胞抗原，增強(qiáng) T 細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性。靶標(biāo)特異性和 T 細(xì)胞生命周期是治療成功的決定性因素。
具體做法是從患者或供體血液中分離出特定類型的細(xì)胞，然后對(duì) T 細(xì)胞進(jìn)行離體基因改造，讓 T 細(xì)胞表達(dá)識(shí)別特定腫瘤抗原的 CAR 蛋白。我們需要通過對(duì) CAR 構(gòu)建體進(jìn)行工程改造和篩選來克服毒性、低抗原敏感性等限制，并在不影響安全性的情況下提高抗腫瘤效果。
CAR 構(gòu)建體和腫瘤抗原之間存在復(fù)雜的生物相互作用，因此我們需要利用正交體外細(xì)胞和蛋白質(zhì)分析測(cè)定。
CAR 構(gòu)建體設(shè)計(jì)和篩選解決方案
Octet? 非標(biāo)記生物分子相互作用分析平臺(tái)
Octet???平臺(tái)可使用生物層干涉 (BLI)技術(shù) 或表面等離子共振 (SPR)技術(shù)，并行測(cè)量蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用，無需使用檢測(cè)劑。這種穩(wěn)健的方法能夠快速、實(shí)時(shí)地表征表達(dá)的蛋白，即使在復(fù)雜和未純化的樣品中也是如此。
特色應(yīng)用包括：
- 蛋白質(zhì)表達(dá)和抗原密度的定量
- 通過結(jié)合和競(jìng)爭(zhēng)分析來檢測(cè)和篩選 CAR 親和力
- 抗體、抗體片段 (ScFV) 的表位配對(duì)
CellCelector 自動(dòng)細(xì)胞篩選和分離平臺(tái)
CellCelector 提供獨(dú)特的全自動(dòng)細(xì)胞成像和分離平臺(tái)，用于檢測(cè)、篩選和分離單細(xì)胞、細(xì)胞集群、腫瘤球、類器官、單細(xì)胞克隆團(tuán)和貼壁集落。平臺(tái)從以下方面為 CAR-T 構(gòu)建體開發(fā)提供了出色的解決方案：
- 基因組編輯 (CRISPR) 后的集落挑取 - 通過單細(xì)胞克隆選擇具有所需遺傳特征的細(xì)胞
- 單細(xì)胞異質(zhì)性分析 - 根據(jù)熒光標(biāo)記并通過不同的形態(tài)學(xué)特征選擇靶細(xì)胞。
- 精確數(shù)量細(xì)胞的分離 - 在驗(yàn)證試驗(yàn)中分離高質(zhì)量加標(biāo)參比品所需的準(zhǔn)確細(xì)胞數(shù)量。
相關(guān)應(yīng)用指南：CellCelector Flex 干細(xì)胞 | 基于圖像的全自動(dòng)干細(xì)胞克隆篩選及分離?
Incucyte? 活細(xì)胞分析平臺(tái)
在培養(yǎng)箱的穩(wěn)定條件下實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)活細(xì)胞成像。做出正確的培養(yǎng)決策，快速優(yōu)化和改進(jìn)工作流程，研究復(fù)雜的活細(xì)胞分析，加快您的下一步發(fā)現(xiàn)。
- 監(jiān)測(cè)模型細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞健康、增殖以及毒性、活力
- 蛋白表達(dá)評(píng)價(jià)
相關(guān)電子書：發(fā)掘 T 細(xì)胞的力量
iQue? 高通量流式細(xì)胞平臺(tái)
借助 iQue? 高通量流式細(xì)胞儀平臺(tái)以及貼壁細(xì)胞檢測(cè)組合產(chǎn)品，使用極少樣品即可實(shí)現(xiàn)快速、可靠、高通量的分析
- 修飾后 T 細(xì)胞的細(xì)胞健康、活力和增殖
- CAR 基因、蛋白表達(dá)評(píng)價(jià)
- 抗體| ScFv 庫篩選為 CAR 結(jié)構(gòu)中常用的配體結(jié)合域
帶有集成超濾器的 Arium? Pro VF 或 UF 超純水系統(tǒng)
T 細(xì)胞工程包括不同的基因編輯技術(shù)，而這些技術(shù)對(duì)核酸酶活性敏感。Arium? 超純水系統(tǒng)生產(chǎn) ASTM 一級(jí)水以及不含 RNase/DNase 和內(nèi)毒素的超純水，確保提供一致且高質(zhì)量的結(jié)果。
- 有效去除 TOC、內(nèi)毒素、DNAse 和 RNAse
- 可搭配多種配件使用，例如打印機(jī)、遠(yuǎn)程分液器
- 包含 IQ/OQ、預(yù)防性維護(hù)等。
- 可滿足每日用水量高達(dá) 100 升/天。
- 包含可視化 SOP 監(jiān)控以及警報(bào)和警告推送通知
賽多利斯 CAR 構(gòu)建體設(shè)計(jì)和篩選解決方案提供：
CellCelector 是用于根據(jù)目標(biāo)基因型來靶向分離、挑取和轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的優(yōu)質(zhì)工具。基于納米孔的高通量圖像驗(yàn)證克隆 (HT-NIC) 單細(xì)胞克隆方法集成了單克隆性和活力證明功能，可在克隆轉(zhuǎn)移到 96 或 384 孔板后實(shí)現(xiàn)行業(yè)領(lǐng)先的生長速率。
Octet? BLI 軟件具有內(nèi)置表位分組模塊，讓分析從設(shè)計(jì)到執(zhí)行再到解讀都更輕松，能夠在交叉競(jìng)爭(zhēng)分析中區(qū)分結(jié)合相同抗原但不結(jié)合相同表位的抗體。
通過極快的孔板取樣、集成分析和新型數(shù)據(jù)簡(jiǎn)化工具，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中突破處理量瓶頸。iQue? 高通量流式細(xì)胞儀平臺(tái)完成 96/384 孔板分析僅需 5/20 分鐘，可以更快地獲得結(jié)果。
相關(guān)文獻(xiàn)
- GPC2-CAR T cells tuned for low antigen density mediate potent activity against neuroblastoma without toxicity: Cancer Cell
- The IgG4 hinge with CD28 transmembrane domain improves VHH-based CAR T cells targeting a membrane-distal epitope of GPC1 in pancreatic cancer | Nature Communications
Reference: Rafiq, S., Yeku, O., Jackson, H. et al. Targeted delivery of a PD-1-blocking scFv by CAR-T cells enhances anti-tumor efficacy in vivo. Nat Biotechnol 36, 847–856 (2018). https://doi.org/10.1038/nbt.4195