Incucyte^? 線粒體膜電位分析

線粒體膜電位（MMP 或 ΔΨm）是在電子傳遞鏈合成 ATP 時，維持合成所需氫離子電化學勢的基本組成部分，并已證明是維持線粒體健康的重要因素。在正常生理活動下，MMP 保持相對穩(wěn)定。然而，長期的干擾會對細胞健康和活力產生不利影響，導致各種病理生理問題。MMP 的監(jiān)測可提供早期線粒體完整性的靈敏指標，對于識別與糖尿病、癌癥和神經退行性疾病等病理性疾病相關的線粒體功能障礙非常關鍵。

評估 MMP 的常用分析通常依賴于間接的串聯(lián)終點測定，難以通過形態(tài)變化進行驗證。Incucyte^? 線粒體膜電位分析方案能夠實時檢測活細胞中 MMP 的瞬時和長期變化，并可以與細胞標記、細胞凋亡或細胞毒性試劑聯(lián)合使用，進一步評估細胞健康。持續(xù)追蹤 MMP 變化，揭示細胞穩(wěn)態(tài)和疾病的復雜性。

應用

Incucyte^? 線粒體膜電位分析簡介

Incucyte^? 線粒體膜電位分析可提供一種綜合性解決方案，支持在細胞培養(yǎng)箱內實時自動觀察和定量分析 MMP 變化。與 TMRE 和 TMRM 分析類似，Incucyte^? MMP 橙色試劑可滲透細胞，并在活性線粒體中累積，與線粒體膜電化學梯度產生的 ΔΨm 成比例。 ?MMP 下降表示線粒體的功能和/或完整性受到干擾，也可將其用作細胞凋亡的早期指標。

該分析試劑盒使用兩種對照化合物：FCCP，一種解偶聯(lián)劑，可轉運 H+ 離子穿過線粒體膜并使線粒體膜去極化（表現為熒光減少）；寡霉素 A，一種 ATP 合酶抑制劑，可導致膜超極化（表現為熒光增加）。

關鍵優(yōu)勢

評估線粒體壓力?-使用便捷的即混即讀方案對線粒體壓力進行動力學測定
檢測活細胞中 MMP 的變化?-?自動生成定量且可重現的活細胞中 MMP 的測定數據 - 全部分析在細胞培養(yǎng)箱內完成
監(jiān)測細胞形態(tài)變化并結合細胞健康試劑進行多重分析?-?可觀察細胞形態(tài)隨時間的變化，結合細胞凋亡或細胞毒性讀數，評估與代謝變化相關的細胞健康變化

評估線粒體壓力

利用 Incucyte^? MMP 橙色試劑盒，通過便捷的即混即讀方案快速可視化和定量分析 MMP 的變化。

檢測活細胞中 MMP 的變化

自動生成定量且可重現的活細胞中 MMP 的測定數據。通過檢測熒光強度隨時間的變化定量分析 MMP 變化。

圖 1. 線粒體膜電位的動力學監(jiān)測。在 Incucyte^? MMP 橙色染料存在的情況下，使用溶媒、喜樹堿、FCCP 或寡霉素處理 HeLa 細胞，然后監(jiān)測（隨時間變化）化合物對線粒體膜電位的影響 (A)。對照孔和藥物處理孔的平均熒光強度線性圖突出顯示了化合物誘導 0 小時和 40 小時的線粒體極化變化 (B)。使用 Incucyte^? Cell-by-Cell 分析軟件進行無標記細胞計數 (C)。溶媒、FCCP、寡霉素（6 小時）、喜樹堿處理（40 小時）獲得的高清相位/熒光圖像 (D)。

監(jiān)測細胞形態(tài)變化并結合細胞健康試劑進行多重分析

Incucyte^? MMP 橙色試劑盒可與 Incucyte^? Caspase 3/7、Annexin V 或 Cytotox 染料聯(lián)合用于定量細胞凋亡或細胞毒性，以及觀察細胞形態(tài)隨時間的變化。

圖 2. 結合細胞健康讀數的多重線粒體膜電位測定。在 Incucyte^? MMP 橙色試劑和 Cytotox NIR 染料存在的情況下，使用蛋白激酶抑制劑十字孢堿 (SSP) 處理 HeLa 細胞，然后聯(lián)合評估化合物的細胞毒性及其對線粒體膜電位的影響 (A)。(B) 圖中顯示了 MMP 和 Cytotox NIR 檢測的濃度相應曲線（24 小時數據）。(C) 圖中顯示了對照孔、0.3 μM SSP 處理孔和 3 μM SSP 處理孔的代表性高清相位 + 熒光圖像（在 24 小時的時間點）。