使用高通量流式細(xì)胞技術(shù)和活細(xì)胞分析技術(shù)表征和優(yōu)化誘導(dǎo)多能干細(xì)胞培養(yǎng)
閱讀時長: 13分鐘?| 作者: Daryl Cole, Kirsty McBain, Nina Senutovitch, Nicola Bevan, Clare Szybut
iPSCs 是許多研究和臨床開發(fā)領(lǐng)域的寶貴資源，如藥物開發(fā)、癌癥研究、組織類器官模型建立以及神經(jīng)生物學(xué)研究等。此外，iPSC 在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用日趨增多。
iPSCs 需要高度特定的最佳生長條件來維持多能性、生存力和增殖潛力。這些要求常昂貴，并且培養(yǎng)方法可能屬于時間密集型，因而需要復(fù)雜的技術(shù)。
iPSCs 的長期培養(yǎng)可能會形成基因型和表型異質(zhì)性，即使在單一細(xì)胞來源的細(xì)胞系中也是如此；因此，必須開發(fā)能夠?qū)崟r監(jiān)測分析，并減少iPSC 細(xì)胞系異質(zhì)性的方法。
該應(yīng)用說明描述了一種高效且便捷的組合方法以進(jìn)行iPSCs 表征、維護(hù)、放大和篩選。通過Incucyte? 實時活細(xì)胞分析系統(tǒng)進(jìn)行實時、可視化的形態(tài)學(xué)分析，并使用iQue? 高通量流式細(xì)胞儀，通過消耗少量樣品（10 μL）進(jìn)行快速表征。
主要內(nèi)容
本應(yīng)用說明著重介紹的關(guān)鍵工作流程優(yōu)勢包括：
- 精簡工藝和數(shù)據(jù)分析可節(jié)省時間和試劑成本，從而減少低質(zhì)量細(xì)胞產(chǎn)品造成的損耗
- “微量化”實驗可降低抗體試劑成本，并節(jié)省用于下游擴(kuò)展、表征和分化的樣品
- 在整個時間過程中監(jiān)測iPSC 細(xì)胞系，從而更深入地了解隨時間推移的形態(tài)學(xué)和多能性變化
快速、免清洗、無需固定的檢測方案，靈活檢測多能性表面標(biāo)志物
圖 1.?用于iPSC細(xì)胞系選擇和分化監(jiān)測的iQue??和Incucyte??組合工作流程示意圖