使用層析的方法對(duì)蛋白質(zhì)分子進(jìn)行純化進(jìn)而進(jìn)行表征是相關(guān)基礎(chǔ)與應(yīng)用研究既普遍又都必不可少的操作。

傳統(tǒng)的樹脂層析柱在蛋白純化發(fā)展的進(jìn)程中發(fā)揮了巨大的作用，但也存在一些弊端，例如：

• 過程耗時(shí)、裝柱及脫氣等操作繁瑣
• 難以實(shí)現(xiàn)高通量，
• 硬件投入大 等等

為了解決這些問題，膜層析技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。如果您對(duì)膜層析技術(shù)還沒有深入的了解，那讓我們一起通過劍橋大學(xué)解剖學(xué)系 Alan R. Johnson 博士的平行對(duì)比實(shí)驗(yàn)看看膜層析技術(shù)與傳統(tǒng)樹脂凝膠層析純化在所需時(shí)間、蛋白質(zhì)產(chǎn)量和活性及成本和設(shè)備要求幾個(gè)方面的對(duì)比。

Vivapure^??膜層析離心柱：輕松實(shí)現(xiàn)高通量

Sartobind^? 膜層析柱：純化如過濾般簡(jiǎn)單（可接注射器、蠕動(dòng)泵與FPLC系統(tǒng)）

實(shí)驗(yàn)使用DEAE陰離子交換樹脂層析柱和離心型陰離子交換膜層析Vivapure^? D柱，分別用于純化可溶性軸突生長(zhǎng)抑制蛋白，該蛋白從第 7 天的雞胚晶狀體中獲得。它能夠引導(dǎo)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGC）軸突走向視神經(jīng)盤，并在視神經(jīng)盤聚集成束形成視神經(jīng)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

蛋白質(zhì)產(chǎn)量和活性的對(duì)比

在這兩種方法中，1M NaCl 洗脫液中的總蛋白質(zhì)含量最低，但活性最高。Vivapure^? 純化的樣品尤為如此。這表明使用Vivapure^? 層析柱進(jìn)行蛋白純化可實(shí)現(xiàn)更高分辨率的分離。

所需時(shí)間

兩種分離方法所需的時(shí)間有很大差異，使用膜層析離心柱分離所需的時(shí)間不到20 分鐘，而使用傳統(tǒng)柱層析法分離所需的時(shí)間為數(shù)天。

成本和設(shè)備要求

使用Vivapure^? 無需昂貴的硬件投入，僅需低速離心機(jī)即可，因此成本投入比傳統(tǒng)凝膠法低67%。

可見新興的膜層析技術(shù)在這幾個(gè)方面均有不可比擬的優(yōu)勢(shì)。不僅如此，膜層析的優(yōu)勢(shì)還包括：

• 不需裝柱，不需脫氣操作及其簡(jiǎn)單
• 流速快，1h能進(jìn)行112個(gè)循環(huán)，特別適合篩選和條件優(yōu)化
• 可以使用離心、注射器、蠕動(dòng)泵、FPLC系統(tǒng)操作
• 產(chǎn)量高，特別是病毒樣顆粒
• 易于放大且能耗低

因此創(chuàng)新且可靠的純化方法的問世可以帶來研究速度的提升，簡(jiǎn)化工作流程節(jié)約成本和費(fèi)用，我們有理由相信，未來膜層析在蛋白純化領(lǐng)域?qū)l(fā)揮更加巨大的價(jià)值。

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