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原生質(zhì)體 - 植物細(xì)胞

植物細(xì)胞/原生質(zhì)體分離

擬南芥屬于十字花科(如花椰菜),是一種用于作物研究的模式生物。甘藍(lán)型油菜(colza)同屬擬南芥科,因此擬南芥作為研究再生能源的模型而受到關(guān)注。擬南芥的完整遺傳編碼是已知的,而且其生長(zhǎng)特性允許我們可以在短時(shí)間內(nèi)調(diào)查幾代樣本(每代時(shí)間約為6周)。

首先,使用纖維素酶處理植物單細(xì)胞以去除細(xì)胞壁。在 CellCelector 顯微鏡的相差、明場(chǎng)和熒光模式下,通過(guò)顯微鏡檢測(cè)緩沖液中的單細(xì)胞。此顯微鏡可以自動(dòng)檢測(cè)熒光染色植物細(xì)胞。

圖 1:掃描圖的詳細(xì)圖像。非熒光細(xì)胞旁的熒光擬南芥葉片細(xì)胞。

CellCelector 有助于抽取活的完整細(xì)胞,這是下游過(guò)程的先決條件,如通過(guò)單細(xì)胞 RT-PCR 進(jìn)行 RNA 分析。

圖 2:使用 CellCelector 在熒光通道中挑取原生質(zhì)體的記錄。

左圖:挑取前;右圖:挑取后。

圖 3:在明場(chǎng)條件下采集擬南芥原生質(zhì)體的圖像記錄。

左圖:挑取前;右圖:挑取后。

圖 4:使用通過(guò) CellCelector 分離的擬南芥葉片細(xì)胞進(jìn)行 gdp2 的 RT-PCR。甘氨酸脫羧化酶 (gdp) 參與 C4 植物的光呼吸循環(huán)。

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