在單細胞水平破譯循環(huán)腫瘤細胞異質(zhì)性
循環(huán)腫瘤細胞 (CTCs)是從腫瘤中脫落并進入血液循環(huán)的細胞。這些細胞在繼發(fā)部位微環(huán)境適應和定植后會形成轉(zhuǎn)移灶，導致超過 90% 的腫瘤相關死亡。通過簡單抽血獲得的 CTC 可以作為“液體活檢”實時監(jiān)測腫瘤特征，包括腫瘤間和腫瘤內(nèi)異質(zhì)性。然而，由于少量 CTC 細胞和大量白細胞和紅細胞的數(shù)量懸殊，CTC 分離和后續(xù)表征在技術上具有挑戰(zhàn)性。研究人員們已經(jīng)開發(fā)了用于 CTC 檢測、富集和分離的多種分析方法。這些方法都利用了 CTC 特異性特性，如表面標志物或例如尺寸、密度或變形性。
賽多利斯為您提供一套獨特的完整解決方案，用于在富集和染色步驟后，進行CTC檢測并分離。您可以將分離細胞用于 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)組分析。該解決方案以賽多利斯 CellCelector 系統(tǒng)作為CTC檢測儀，配合專門開發(fā)的耗材（例如 CellCelector 納米孔陣列、MagnetPick 載玻片）和經(jīng)驗證的方案。
使用 CellCelector 的單細胞 CTC 分離和分析工作流程
在典型 CTC 分離和分析工作流程中應用 CellCelector。*紅細胞 (RBC) 裂解是可選的，取決于使用的富集技術；**某些富集技術允許富集后原位染色；在其他情況下，應在從富集裝置中取出樣本后進行染色。
與現(xiàn)有富集技術完全兼容
如許多出版物所述，CellCelector 平臺與多種上游富集技術兼容：
陽性免疫磁珠富集法（基于EpCAM表面標志物等）： 例如CellSearch?, Isoflux?, MagSweeper?
基于CD45表面標志物的白細胞（WBC）陰性消除方式：例如Dynabeads?, RosetteSep?
基于微流體或過濾器的非標記分離：例如Parsortix?, Clearbridge?, Vortex?, ScreenCell?, RareCells?, Circulogix? etc.
CellCelector 工作流程和耗材可以處理多達幾十萬個血細胞的單份樣本，無需減少樣本量。
富集技術 | 參考文獻 |
|---|---|
陽性免疫磁珠 | |
CellSearch??(EpCAM) | Neumann et al., 2016 |
Isoflux??(EpCAM) | Ma et al., 2016; Cabezas-Camarero et al., 2019; Nimir et al., 2019; Ding et al., 2019 |
MagSweeper??(EpCAM) | Lohr et al., 2014 |
Dynabeads 和手持磁珠 (rVAR2) | Agerb?k et al., 2018; Bang-Christensen et al., 2019 |
CD45 陰性耗竭 | |
Dynabeads??CD45/Dynal? MPC?-S | Blassl et al., 2016 |
RosetteSep??Human CD45 | Yao et al., 2014 |
基于尺寸的分離 | |
Parsortix? | Lampignano et al., 2017; Szczerba et al., 2019; Gkountela et al., 2019; Reinhardt et al., 2019; Donato et al., 2019 |
密度梯度離心 | |
OncoQuick? | Heidary et al., 2014 |
在 CellCelector 單細胞分離步驟前使用的 CTC 富集技術和相應的已發(fā)表論文（可在“參考文獻”頁面查找參考文獻全文）。
各種癌癥類型的 CTC 分離
癌癥類型 | 參考文獻 |
|---|---|
乳腺癌 | Heidary et al., 2014; Schneck et al., 2015; Neumann et al., 2016; Lampignano et al., 2017; Szczerba et al., 2019; Gkountela et al., 2019; Reinhardt et al., 2019; Sprouse et al., 2019 |
前列腺癌 | Lohr et al., 2014; Ma et al., 2016; Nimir et al., 2019 |
結直腸癌 | Adalsteinsson et al., 2013; Cabezas-Camarero et al., 2019 |
胰腺癌 | Kim et al., 2019 |
卵巢癌 | Blassl et al., 2016 |
肺癌 | Yao et al., 2014; Ding et al., 2019 |
腦癌 | Agerb?k et al., 2018; Bang-Christensen et al., 2019 |
黑色素瘤 | Sprouse et al., 2019 |
CellCelector 技術能夠從各種癌癥類型的液體活檢樣本中分離得到純的單個腫瘤細胞。全球已有多家前沿癌癥研究中心使用 CellCelector 系統(tǒng)致力于眾多癌癥實體和應用領域的發(fā)展。
使用 CellCelector 平臺分離 CTC 的優(yōu)勢
值得信賴
- 極低的細胞損失（無死體積）
- 單細胞挑取效率可達幾乎 100%（取決于工作流程）
- 自動挑取控制（挑取成功/失敗）
快速
- 可以在 10 分鐘內(nèi)挑取 20 個單個 CTC，與 RNA 分析和活細胞挑取兼容
- 每份樣本的 CTC 計數(shù)和蛋白細胞分離大約需要 1 小時（使用已富集且已染色的樣本）
易于操作
- 無需復雜的樣品制備
- 功能強大的用戶友好型軟件
功能多樣
- 分離單個 CTC 和細胞群
- 分離固定細胞和活細胞
- 與各種上游富集方法直接兼容
- 基于細胞形態(tài)、病理染色和/或多達 6 個熒光標記的自動化 CTC 檢測
- 自動、半自動或手動細胞選擇以進行挑取
- 挑取單細胞或細胞池
- 與大多數(shù)實驗室器具兼容：孔板、 培養(yǎng)皿、顯微鏡載玻片、PCR 板/管、納米孔陣列、定制耗材等。
與各種下游分析和培養(yǎng)工作流程完全兼容
- 與包括 NGS、RNAseq 等在內(nèi)的多種單細胞分子分析方法兼容。
低量抽吸和分配樣本，與所有單細胞 WGA 和 qRT-PCR 試劑盒無縫兼容
- 目的位置溫度受控 (4～37 ℃)，有效防止 RNA 降解或促進活細胞存活
- 以低剪切力進行快速挑取，利于活細胞擴增
