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利用高通量流式細胞儀進行細胞計數(shù)和細胞活力評估

細胞計數(shù)和細胞活力

細胞計數(shù)是一種標準的實驗室方法,常用于從生命科學(xué)到醫(yī)學(xué)診斷的許多實驗工作流程中。將細胞計數(shù)評估與細胞活力相結(jié)合是表征細胞健康狀況的重要步驟。細胞計數(shù)和細胞活力信息可用于監(jiān)測增殖率、優(yōu)化生長條件和歸一化細胞數(shù)據(jù)以供進一步研究。

為獲得最佳結(jié)果,準確且可重現(xiàn)的細胞計數(shù)和細胞活力測量至關(guān)重要。測量細胞計數(shù)和細胞活力的傳統(tǒng)方法通常通量低,缺乏線性,并且操作過程耗時,無法提供滿足活細胞分析重現(xiàn)性和準確度所需的足夠的事件采樣。

iQue? 細胞計數(shù)和活力分析試劑盒可在 96 孔和 384 孔板中在寬線性范圍內(nèi)獲得高準確度,并通過從細胞標記到分析的簡化工作流程(無需細胞稀釋),對來自各種非貼壁細胞系的絕對細胞計數(shù)和活力數(shù)據(jù)進行可重現(xiàn)的分析。利用 iQue? 高通量流式細胞儀高效準確地定量細胞計數(shù)和細胞活力。


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檢測原理

iQue? 細胞計數(shù)和活力分析試劑盒檢測原理

該測定試劑盒專為定量分析細胞計數(shù)和細胞活力而設(shè)計,其經(jīng)過優(yōu)化,可在采用 BR 和 VBR 配置的 iQue? 平臺上運行,并且與高通量采樣和流式細胞儀檢測功能相結(jié)合。其利用從細胞標記到分析的簡化的工作流程,能夠在寬線性范圍內(nèi)對各種非貼壁細胞系的絕對細胞計數(shù)和細胞活力進行快速分析。

該試劑盒中包含經(jīng)驗證的試劑和預(yù)置模板,用于設(shè)門策略和分析。其使用客戶提供的細胞,在快速、無需洗滌的分析中鑒別活細胞并測定樣品密度。

基本的分析工作流程:

  • 將未稀釋的細胞與細胞活力染料以 1:1 的比例混合并孵育 10-30 分鐘
  • 將計數(shù)微珠加入孔中
  • 在 iQue? 平臺(采用 BR 和 VBR 配置)上對樣品板進行分析

關(guān)鍵優(yōu)勢

提高生物學(xué)工作流程的準確度和重現(xiàn)性

通過對細胞計數(shù)和細胞活力的多重評估,確保獲得穩(wěn)定的實驗結(jié)果



圖 1.在較寬范圍內(nèi)進行可重現(xiàn)和準確的細胞活力評估和細胞計數(shù)

(A) 對各種比率的生長細胞與熱滅活細胞(Jurkat、Raji 或 Ramos 細胞系)的混合物進行測試,以確保整個靈敏度范圍內(nèi)的線性相關(guān)性。

(B) 比較不同密度的 Jurkat 細胞以確定細胞計數(shù)的線性范圍??煽康販y量密度范圍為 8 × 104 個細胞/mL 至 2 × 107 個細胞/mL 的未稀釋的細胞。

實現(xiàn)高通量分析

在 96 或 384 孔板中,在寬線性范圍內(nèi)高效定量測定細胞活力和細胞計數(shù)

圖 2.利用熱圖和透視圖得到可操作的數(shù)據(jù)

通過將有限稀釋的 CHO-S 細胞接種到 96 孔板中來進行有限稀釋克隆。將細胞置于定軌搖床上,在 37 ℃ 和 5% 濕度下培養(yǎng)。外孔僅含培養(yǎng)基,以免產(chǎn)生邊緣效應(yīng)。使用 iQue? 細胞計數(shù)和活力分析試劑盒測定細胞密度和細胞活力。生成 Profile Map,以突出顯示滿足多項標準 [(細胞密度 > 30 萬個細胞/mL)且(細胞活力 > 75%)] 的孔??赏ㄟ^拖動圖表頂部的滑塊或右鍵單擊編輯來調(diào)整 Profile Map 中的各項指標,“匹配”圖將自動更新。匹配結(jié)果可導(dǎo)出為 CSV 文件,用于選擇匹配結(jié)果或其他下游分析。

(A) 細胞密度熱圖

(B) 細胞活力熱圖

(C) 顯示與較高密度和活力結(jié)果匹配的 Profile Map

節(jié)省寶貴的樣品

樣品量需求少 (10 μL),從而為更關(guān)鍵的下游分析節(jié)省寶貴的樣品。

圖 3. 小體積(10 μL/樣品)方案可節(jié)省細胞并縮短設(shè)置時間。

最大程度地提高分析效率

簡化的工作流程,采用快速、簡單的方案,無需進行細胞清洗和稀釋


圖 4.模板化圈門和分析

將提供的帶有預(yù)設(shè)圈門、采集設(shè)置和分析的模板導(dǎo)入 iQue? ForeCyte? 軟件,實現(xiàn)對細胞計數(shù)和細胞活力的定量。

訂購信息

訂購信息

平臺:與 iQue? 3/iQue? Screener Plus - VBR 和 BR 配置兼容

iQue? 細胞計數(shù)和活力分析試劑盒

1 × 96 孔

BA-97110

5 × 96 孔

BA-97111

1 × 384 孔? ?

BA-97112

5 × 384 孔? ??

BA-97113


資源

iQue? 細胞計數(shù)和活力分析試劑盒產(chǎn)品指南

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